产品简介:
中文名称:病毒DNA/RNA提取试剂盒(吸附柱法)
英文名称:Virus DNA/RNA Extraction Kit(Adsorption column method)
试剂规格:50T/盒。
储存运输:室温保存,有效期12个月。可室温下运输。
自备材料:灭菌的1.5mL离心管、各种规格灭菌的枪头、离心机(大转速≥14000rpm)、无水乙醇、漩涡混合器等。
本试剂盒可以从多种样本中提取DNA/RNA,包括血清、血浆、动物组织、体液等。处理的样本通过加入裂解液后,把混合物移至吸附柱中,之后可以通过洗涤、洗脱,即可分离出病毒DNA/RNA。
本试剂盒提取的核酸可以用于Real-time PCR,Northern Blot,Blotting Hybridization ,cDNA library Construction等实验。
试剂组成:
名 称 | 规格 |
裂解液 | 25mL |
去蛋白漂洗液 | 18mL(使用前加入12mL无水乙醇) |
洗涤液 | 12mL(使用前加入48mL无水乙醇) |
洗脱液 | 10mL |
吸附柱 | 50个 |
使用说明书 | 1份 |
技术信息:
方法 | 耗时 | 大体积 | 吸附率 |
吸附柱法 | 7-15分钟 | 750μL | ≥90% |
样本类型 | 样本需求量 |
血清、血浆 | 200μL |
组织匀浆上清液 | 200μL |
腹水等 | 1-10 mL |
培养的细胞 | ≥2×106个 |
检测方法:
一、样本前处理
动物、植物组织:将样本用生理盐水或PBS缓冲液充分研磨,离心取上清后进行样本提取操作。
血清、血浆、体液等样本:直接进行样本提取操作(不足200μL,可以加入PBS缓冲液或者生理盐水补足200μL)。
二、样本提取操作
1.取200μL处理好的样本(不足200μL,可以加入PBS缓冲液或者生理盐水补足200μL),加入500μL裂解液,振荡30秒,室温静止2分钟。注:针对难裂解样本,室温静置时间可延长至5分钟。
2.把上述混合液转移到吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质,以免阻塞吸附膜),10000rpm离心1分钟,弃去套管中液体。
3.向吸附柱中加入500μL去蛋白漂洗液,12000rpm离心30秒,弃去套管中液体。
4.向吸附柱中加入500μL 洗涤液,12000rpm离心30秒,弃去套管中液体。
5.向吸附柱中加入500μL 洗涤液,12000rpm离心30秒,弃去套管中液体。
6. 12000rpm再次离心2分钟。
7.把吸附柱转移至新的1.5mL灭菌离心管中,向吸附柱中加入 50μL洗脱液,并于室温温育2分钟。
8.12000rpm离心1分钟,弃去吸附柱,1.5mL灭菌离心管中液体即为DNA/RNA溶液。提取的DNA/RNA可直接用于各种下游应用试验,如不立即使用,请于-80℃保存。
注意事项:
1.如果有冷冻离心机,建议在4℃进行离心。
2.请穿戴手套,用DEPC水浸泡所有的枪头和离心管以保证不含有RNA酶,如果条件允许,请在超净工作台进行。
3.使用前请检查裂解液中是否有结晶,如果由于温度过低导致溶液结晶,请将裂解液置于56℃温浴,使结晶*溶解后再使用。
4.去蛋白漂洗液、洗涤液请按照说明书加入无水乙醇。
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